不同月龄林下仿野生栽培金线莲有效成分含量研究

　　摘要 金线莲为名贵中药材，野生资源稀缺，林下仿野生栽培是满足人们对金线莲数量和品质需求的较好途径。本文利用林下仿野生栽培的金线莲，对不同月龄干燥全草有效成分含量进行了研究。结果表明，6月龄和8月龄干燥全草总黄酮(以芦丁计)含量分别为9.226 mg/g和9.627 mg/g，后者较前者提高4.35%;多糖(以无水葡萄糖计)含量分别为191.702 mg/g和125.249 mg/g，后者较前者下降34.66%;多酚(以没食子酸计)含量分别为8.006 mg/g和8.641 mg/g，后期较前者提高7.93%。初步表明，林下仿野生栽培金线莲全株总黄酮和多酚含量随月龄延长而提高、多糖含量随月龄延长而下降。这一结果可为金线莲的临床应用提供一定的参考。

　　关键词 金线莲;林下仿野生栽培;月龄;总黄酮;多糖;多酚

　　金线莲(Anoectochilus roxburghii)是一种名贵稀有中药材，素有“南方冬虫夏草”“药王”等美誉，以全草入药，具有清热、凉血、解毒、祛风除湿等功效[1]。金线莲喜阴凉潮湿，适宜生长温度为20～32 ℃，适宜光照约为正常日照的1/3，生长条件比较苛刻，所以人工栽培一般对设施要求严苛，生产成本高，且有效成分含量不如野生金线莲。利用高山林下阴凉湿润、避光的自然环境和山林中的自然蓄水条件，以林下腐殖质作为培养基质，可实现林下仿野生栽培。有研究表明，林下仿野生种植的金线莲体外抗氧化活性与野生型金线莲无显著差异[2]。林下栽培多处于高山密林中，自然生态条件优异，其安全品质较人工设施栽培更好。林下仿野生栽培金线莲，既满足了人们对金线莲稀有药材数量和品质的需求，又增加了种植业收入，是发展林下经济的一种有益模式。本研究对林下仿野生栽培的金线莲不同月龄干燥全草中总黄酮、多糖、多酚3个重要有效成分指标进行了比较分析。

　　1 材料与方法

　　1.1 试验材料

　　试验材料为林下仿野生栽培的6月龄金线莲和8月龄金线莲干燥全草。林下仿野生栽培地点位于浙江省建德市三都镇羊峨村尖竹山，该山平均海拔810 m，基地位于该山海拔700～720 m的北麓，平均坡度42°，树木类型以水杉、毛竹为主，夏季平均遮光度66%～73%，生长期每月温湿度如表1所示。水源为基地上游约50 m处收集的山泉，pH值7.87。利用林下落叶腐殖物和风化土顺坡做畦，畦面高12 cm、宽80 cm，土壤pH值4.60。6月龄金线莲于2018年5月10日定植，8月龄金线莲于2018年3月10日定植，行株距为10 cm×10 cm。金线莲种苗由金华市农业科学研究院通过组织培养培育，苗龄3～4叶。2018年11月5日分别随机收取金线莲全草、低温烘干，分别称取200 g干样本用于检测。

　　1.2 仪器与试剂

　　试验所用主要仪器：UV2450紫外分光光度计，由岛津公司生产;R-201旋转蒸发仪，由上海申顺生物科技有限公司生产;DK-S26型电热恒温水浴锅，由上海森信试验仪器有限公司生产;KQ-250B超声波洗涤机，由昆山市超声仪器有限公司生产。

　　主要试剂：没食子酸、芦丁标准样品，由Aladdin公司生产;福林酚试剂，由Wolsen公司生产;其他试剂均为分析纯级。

　　1.3 试验方法

　　总黄酮含量(以芦丁计)用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法测定[3];多糖含量(以无水葡萄糖计)用苯酚-硫酸法测定[4]，多酚含量(以没食子酸计)用Folin-Ciocalteu法测定[5]。检测工作在浙江省现代森林培育技术重点实验室进行，试验温度25 ℃，湿度30%～50%。

　　2 结果与分析

　　2.1 不同月龄金线莲总黄酮含量

　　从图1可以看出，林下仿野生栽培金线莲6月龄干燥全草总黄酮含量为9.226 mg/g，8月龄干燥全草总黄酮含量达到9.627 mg/g，较6月龄提高了4.35%。表明随着月龄延长，金线莲全草总黄酮含量增加。这可能是由于随着月龄延长，次生代谢物质积累增多。

　　2.2 不同月龄金线莲多糖含量

　　林下仿野生栽培金线莲6月龄和8月龄干燥全草多糖含量分别为191.702 mg/g和125.249 mg/g(图2)，8月龄干燥全草多糖含量较6月龄下降了34.66%。表明随着月龄延长，多糖含量下降幅度较大。造成这种变化趋势的原因可能是，作为初级代谢物的多糖在金线莲生长过程中参与其他物质的代谢，部分多糖被转化为黄酮、多酚等其他次生代谢物质。

　　2.3 不同月龄金线莲多酚含量

　　从图3可以看出，林下仿野生栽培金线莲干燥全草多酚含量随月龄延长而增多，6月龄全草多酚含量为8.006 mg/g，到8月龄时增加至8.641 mg/g，提高幅度达到7.93%。多酚含量的增长趋势可能也与多糖代谢和次生代谢物质积累增多有关。

　　3 结论与讨论

　　总黄酮、多糖、多酚等有效成分含量是金线莲营养价值和药用价值的重要指标[6-7]。一般认为，人工栽培金线莲与野生型金线莲相比，有效成分含量较低。本研究中在海拔为700～720 m的建德市高山地区林下仿野生栽培金线莲，结果表明，6月龄至8月龄干燥全草有效成分总黄酮含量为9.226～9.627 mg/g、多糖含量为125.249～191.702 mg/g、多酚含量8.006～8.641 mg/g，与野生金线莲有效成分含量(总黄酮5.337～7.090 mg/g，多糖67.0～191.8 mg/g[8])相当或较优，优于基质栽培有效成分含量(总黄酮5.9～8.9 mg/g，多糖61.8～78.9 mg/g，多酚5.2～7.3 mg/g[9])，表明在高山区林下仿野生栽培的金线莲营养价值和药用价值较高。研究还初步认为，随着月龄延长，初生代谢物多糖的含量有下降趋势，次生代谢物总黄酮、多酚的含量有上升趋势，这一结论可为不同临床目的应用金线莲的月龄标准提供一定的参考。

　　4 参考文献

　　[1] 王国强.全国中草药汇编[M].北京：人民卫生出版社，2014.

　　[2] 阚永军，赵立，杨彬君，等.野生和林下种植金线莲的体外抗氧化活性研究[J].中国民族民间医药，2017，26(6)：15-17.

　　[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015.

　　[4] 张锦雀，吴晓珊，朱善岚，等.金线莲多糖苯酚-硫酸法测定条件的优化[J].中国医学院杂志，2010，30(2)：113-116.

　　[5] 邓燕莉，罗金波，黄甜，等.酸性染料比色法定量检测荷叶总生物碱[J].食品与机械，2011，27(4)：90-93.

　　[6] 施满容，龚林光，陆志平，等.闽东野生金线莲有效成分含量的比较[J].福建农业学报，2016，31(9)：950-956.

　　[7] 许恩婷，许梦洁，邵清松，等.金线莲不同器官及萃取部位的抗氧化活性研究[J].中国食品学报，2019，19(1)：28-33.

　　[8] 顾慧芬，庄意丽，梅其春.野生与组培金线莲有效成分的比較及RAPD分析[J].中成药，2011，33(8)：1364-1367.

　　[9] 朱建军，黄雨佳，金建红，等.不同栽培基质对金线莲3种基原植物生长及其活性成分含量的影响[J].中国中药杂志，2019，44(12)：2467-2471.

　　作者： 孙加焱

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