期刊名称: | 细胞与分子免疫学杂志 | |
期刊级别: | 核心期刊 | |
国内统一刊号: | 61-1304/R | |
国际标准刊号: | 1007-8738 | |
期刊周期: | 月刊 | |
主管单位: | 第四军医大学;中国免疫学会 | |
主办单位: | 中国免疫学会;第四军医大学 | |
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• 期刊信息:《细胞与分子免疫学杂志》Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology(月刊)曾用刊名:单克隆抗体通讯,1985年创刊,是国家级科技期刊。本刊主要报道我国免疫学及相关学科的细胞和分子免疫学方面的理论及应用研究成果。主要内容有专家论坛、细胞和分子免疫学、肿瘤免疫和临床免疫、基因工程抗体和单克隆抗体、综述及信息等。主要读者为免疫学及相关学科的研究院所、大专院校、各医院和卫生防疫工作人员。《细胞与分子免疫学杂志》主管单位:第四军医大学;中国免疫学会,主办单位:中国免疫学会;第四军医大学,国内统一刊号:61-1304/R,国际标准刊号:1007-8738
• 期刊栏目:专家论坛、基础研究、临床研究、抗体工程、技术方法。
• 数据库收录情况:国家新闻出版总署收录 维普网、万方数据库、知网数据库、医学文摘、科学引文索引、化学文摘(网络版)、文摘与引文数据库国立医学图书馆生物医学检索系统、日本科学技术振兴机构中国文献数据库收录
• 影响因子:截止2014年万方:影响因子:0.709;总被引频次:1698
截止2014年知网:复合影响因子:0.716;综合影响因子:0.506
•2016 年《细胞与分子免疫学杂志》01期收录目录表:
悬浮驯化CHO细胞并用于抗前列腺特异性膜抗原的抗体表达 …………………………………………吴介恒;韩东晖;魏铭;郑国旭;焦点;席文锦;杨安钢;秦卫军;温伟红;
缬沙坦抑制高糖刺激下系膜细胞血管紧张素Ⅱ-Notch通路 …………………………………………袁琴;吕川;吴灿;雷莎;邵滢;王秋月;
β葡聚糖促进小鼠骨髓来源的树突状细胞成熟并增强其迁移能力………………………………………… 徐冬勤;张晓航;王勇;宁永玲;丁骏;钱科卿;戚春建;
香烟烟雾提取物抑制树突状细胞诱导CD4~+T细胞分化为CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞 …………………………………………梁毅;周广;张龙举;刘积锋;钟小宁;
外周血内皮祖细胞可增强骨髓间充质干细胞SDF-1和MCP-1的分泌并促进其归巢 …………………………………………魏韩笑;李彩霞;赵娴;袁瑞红;代晓明;李逸松;刘流;
重组人平足蛋白基因在中国仓鼠卵巢细胞的稳定表达 …………………………………………曲乐;赵星鹏;傅建新;夏利军;戴兰;阮长耿;赵益明;
隐丹参酮下调U2OS骨肉瘤细胞血管内皮生长因子表达并抑制血管生成 …………………………………………徐亚梦;冀全博;张强;王岩;
角蛋白18磷酸化增加结肠癌HCT116细胞自噬并提高其对奥沙利铂的敏感性 …………………………………………闫晓东;石英;冦卜心;朱振宇;柴杰;陈德喜;郭洪亮;
脂肪干细胞移植抑制脑缺血大鼠梗死灶周围组织Nogo-A的表达 …………………………………………王杰华;李国前;
范例:悬浮驯化CHO细胞并用于抗前列腺特异性膜抗原的抗体表达
【摘要】:目的将贴壁状态的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞驯化成用无血清培养基培养的悬浮CHO细胞(CHO-S),并验证用该悬浮细胞进行抗体表达的可行性。方法将贴壁状态的CHO-S细胞调整为悬浮培养后,再用逐步降低血清含量的方法将其驯化成用无血清培养基悬浮培养的CHO-S细胞。根据从噬菌体抗体库筛选获得的抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单链抗体的基因序列,人工设计并合成其重链和轻链基因,分别克隆入真核表达载体pc DNA3.1中,所得载体命名为pc DNA3.1-HC和pc DNA3.1-LC。将构建好的2个载体按照轻、重链比例为3∶1的量用Free Style MAX转染试剂瞬时转染CHO-S细胞,转染7 d后收集培养上清,用SDS-PAGE和Western blot法检测抗体表达情况,用流式细胞术检测其与PSMA阳性细胞的结合活性。结果成功将贴壁CHO细胞驯化成悬浮CHO-S细胞,成功构建了表达抗PSMA人源性抗体重链和轻链基因的真核表达载体,并在CHO-S细胞中实现了抗体的分泌表达,流式细胞术检测证实其可特异性结合PSMA阳性前列腺癌细胞。结论成功驯化获得悬浮CHO-S细胞,驯化后的CHO-S细胞可用于抗体的真核表达,为后续抗体的大量表达纯化及功能研究提供了工具。
【关键词】: 细胞驯化 CHO细胞 抗体表达 真核表达 转染
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