论析健脑益智胶囊中人参皂苷Rb1的含量测定

来源:期刊VIP网所属分类:临床医学发布时间:2014-03-08浏览:

  摘要:分别取6批样品,按供试品溶液的制备操作,测定每粒胶囊中人参皂苷Rb1的含量,结果显示,6批样品中最高含量为1.28 mg 最低为0.91 mg,考虑大生产及原料来源,放宽10 %,故暂拟定本品每粒含人参以人参皂苷Rb1计,不得小于0.82 mg。

  关键词:健脑益智胶囊,高效液相色谱,人参皂苷Rb1,含量测定

  健脑益智胶囊是由本院长期临床验方研制而成, 由人参、何首乌、枸杞子等药物组成, 具补气养血、健脑益智之功效。用于气血两虚导致的失眠、健忘等症。其中人参为方中君药, 起补中益气之功效,皂苷类成分是人参中的主要化学成分,其中人参皂苷Rb1为主要有效成分之一。本试验选择以人参皂苷Rb1作为含量测定的指示性成分,针对本制剂特点,通过采用高效液相法测定人参皂苷Rb1的含量,以期为控制本制剂质量提供可靠的实验依据。

  1 器材与药品

  1.1 仪器岛津LC10AC高效液相色谱仪,岛津SPD10A紫外检测器,岛津C7R色谱数据处理机,SK2200H型超声清洗器(上海科导超声仪器有限公司)。

  1.2 试药人参皂苷Rb1对照品(中国药品生物制品鉴定所);样品:本院制剂室生产(批号:20031103、20031113、20031203、20031213、20031223、20040103)。本实验所用试剂除洗脱剂为色谱纯外,其它均为分析纯。

  2 方法和结果

  2.1 色谱条件与系统适用性实验 色谱柱:C18;流动相:乙腈水(30∶70);流速0.8 ml・min1;检测波长203 nm;进样量:20μl,分析方法:外标法;理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000,分离度大于1.5。

  2.2 溶液的制备

  2.2.1 对照品溶液精密称取人参皂苷Rb1对照品2.0362 mg,置10 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得0.2 mg・ml1的对照品溶液。

  2.2.2 供试品溶液取100粒胶囊内容物,研细,精密称取10 g 置锥形瓶中,精密加入甲醇100 ml,称定重量,超声30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足损失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液25 ml,置蒸发皿中,蒸干。残渣以水饱和的正丁醇50 ml分次转移至分液漏斗中,加氨试液振摇提取3次,10 ml/次,合并水层液,用水饱和的正丁醇提取5次,15 ml/次。合并正丁醇提取液,用正丁醇饱和的水洗涤2 次,15 ml/次。合并水层液,再以水饱和的正丁醇15 ml提摇提取2次。合并正丁醇提取液,蒸干,残渣加甲醇转移至10 ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm) 滤过。

  2.2.3 阴性溶液的制备 按处方量称取不含人参的其他药味,按制剂工艺制成制剂后,以供试品溶液制备方法制成阴性溶液。

  2.3 色谱分离及空白实验取人参皂苷Rb1对照品溶液、供试品溶液及阴性溶液分别进样,供试液色谱图中人参皂苷Rb1峰分离良好,理论板数大于4 000 (n = 5) ,分离度均大于1.5,阴性溶液在人参皂苷Rb1出峰处不干扰。

  2.4 线性关系考察精密吸取人参皂苷Rb1对照品溶液1.0,2.0,4.0,6.0,8.0 ml 置10 ml 量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,分别进样20 μl。以峰面积与对应浓度绘制标准曲线,得回归方程:Y= 39 307X - 51 893,r = 0.999 9。结果表明人参皂苷Rb1在0.407~3.258 mg线性关系良好。

  2.5 稳定性取供试品溶液,分别放置2,4,6,8,14,24 h测定峰面积1次,RSD 为1.36 %,说明供试品在24 h 内是稳定的。

  2.6 精密度实验取0.204 mg・ml1的人参皂苷Rb1对照品溶液,重复进样5次,测得人参皂苷Rb1峰面积的RSD为0.47%。

  2.7 样品测定

  2.8 加样回收实验精密称取已知人参皂苷Rb1含量的样品(批号为20031213)6份,分别加入人参皂苷Rb1对照品,按供试品溶液的制备方法提取样品,进样测定,计算回收率。见表2。表2 回收率实验(略)

  3 讨论

  3.1 文献报道中人参皂苷Rb1的测定方法很多[1,2],参考上述文献报道选择HPLC法实验,在流动相的选择上我们比较了乙腈甲醇纯水0. 05 %磷酸水溶液( 20∶40∶10∶30);乙腈水(40∶60)、(35∶75)、(30∶70),结果以乙腈水(30∶70)为流动相分离效果最好,人参皂苷Rb1能与其它成分的峰达到极限分离。

  3.2 在样品提取时,选择甲醇回流1 h,超声提取30,45,60 min 4种方法进行了实验比较,发现以甲醇超声提取30 min,提取效果最好。

  参考文献:

  [1]杨 莹,景 瑞,王 妮. 颈痛片中人参皂苷Rb1 的HPLC 测定方法[J].食品与药品,2005,7 (3A ):58.

  [2]赵德华,杨德智.HPLC测定田七痛经胶囊中人参皂苷Rb1、Rg1 的含量[J].中成药,2005,27(5):532.

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文章名称: 论析健脑益智胶囊中人参皂苷Rb1的含量测定

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