浅析高效毛细管电泳技术与现代中药

　　一种中药材含有多种有效成分，通常各化学组分结构比较复杂，种类多样且在药材中含量不高，用普通的分离方法难以完全分离和定量测定，而多味药材组成的复方的成分测定，普通的分离方法就更加难以胜任了，毛细管电泳可以较好的解决这一问题。

　　关键词：高效毛细管电泳,现代中药,有效成分,鉴别,制剂

　　中药是我国的传统国粹，但是由于中药成分和用药种类的复杂性，其传统研究方法已严重影响了我国中药事业的国际化发展。为加快我国中药的现代化和国际化进程，新的研究方法必须依赖和采用现代仪器技术的应用。高效毛细管电泳技术作为一种新兴的分析分离技术，由于自身的特点和优势在中药的现代研究具有广阔的发展前景。本文就近五年来，高效毛细管电泳技术在中药中的应用及新的发展作一简要综述。

　　1高效毛细管电泳的发展概况及分离原理

　　高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis，HPCE) 又称毛细管电泳 (capillary electrophoresis, CE)是以高压电场为驱动力，毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术，具有分离效率高、速度快、灵敏度高，所需样品少、成本低、抗污染能力强等特点。其理论始于20世纪60年代末，80年代取得技术上的突破，目前已形成毛细管区带电泳(capillary zone electrophoresis，CZE)，胶束电动毛细管色谱(micellar electrokinetic capillary chromatography, MECC),毛细管等速电泳(capillary gel electrophoresis， CGE)，毛细管等电聚焦电泳(capillary isoelectric focusing， CIEF)及毛细管电色谱(capillary electrochromatography，CEC)等分离模式[1]。仪器由一个高压电源、一根毛细管、一个检测器和两个供毛细管两端插入而又可和电源相连的缓冲液贮瓶组成，工作原理是在pH>3的情况下，石英毛细管硅胶表面带负电与溶液接触时形成一双电层，在高电压作用下，双电层中的水合阳离子引起溶液在毛细管内整体向负极方向流动，形成电渗流(EDF)，粒子在毛细管电解质溶液中的迁移速度，等于电泳和电渗流两种速度的矢量和，正离子电泳方向和电渗一致，先流出;中性粒子电泳速度为零，其迁移速度相当于电渗流速度;负离子运动方向和电渗流方向相反，最后流出，从而实现不同组分分离的目的。

　　2在中药有效成分分离测定中的应用

　　郝红艳等[2]利用胶束电动毛细管电泳分析法建立中药罂粟壳中3种生物碱―吗啡、可待因和罂粟碱的含量测定法，其测定结果于HPLC法一致。纪秀红等[3]运用毛细管区带电泳模式对十大功劳属植物中3种生物碱的含量进行测定，结果表明该法具有简便、快速、有效的特点，可用于中药材的质量控制。陈勇川等[4]采用高效毛细管电泳法测定槐花和槐角中芦丁的含量，方法准确、快速、简便、经济。李琴韵等[5]采用HPCE―CZE法对中国药典收载的3个不同品种的14个吴茱萸样品(不同产地)中所含吴茱萸碱进行含量测定，同时还在两种波长下,建立了吴茱萸样品的高效毛细管电泳色谱指纹谱，能将3种不同品种的吴茱萸明显地区分，揭示了其内在质量，方法准确、简便。赵霞等[6]以毛细管区带电泳模式，用内标法分析了 9种贝母药材中浙贝乙素、西贝素、西贝苷等生物碱的含量，结果表明毛细管电泳法可以完全分离贝母药材中的这3种生物碱，并有较好的回收率和重现性。邢凤琴等[7]采用高效毛细管区带电泳模式，对党参样品所含活性成分中的4种有机酸类成分进行分离与测定，样品和标准品在20 min内得到基线分离，且具有良好的准确性和重现性。

　　3在中药制剂生产质量控制中的应用

　　中药制剂成分复杂，目前其质量控制的方法多是测定其中一种指标成分的含量，但这种方法不能完全体现出中药制剂的整体质量，尤其是复方制剂的整体质量。 随着毛细管电泳的采用，分析工作者对中药制剂中多种组分的测定进行了深入研究。尹茶等[8]建立了同时测定银翘解毒片中绿原酸、甘草酸和甘草次酸的高效毛细管电泳法，结果表明：HPCE能在10 min内完成银翘解毒片中3种有效成分的测定，灵敏度高，适于中成药中多种有效成分的同时测定。史国兵等[9]建立中成药九如天宝液毛细管电泳的方法，绘制出相关指纹图，考察了四种不同柞蚕蛾提取物的九如天宝液与市售九如天宝液的指纹图谱的差异，认为，图谱特征明显、专属性强、可为鉴别该药物的真伪提供科学依据;毛细管电泳技术在中药的指纹图谱和质量控制研究中将发挥更大的作用。陈玉英等[10]采用高效毛细管电泳法测定了10批供试样品的HPCE指纹图谱，建立相关的栀子药材的指纹图谱，并对该方法学进行考察，结果符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》中有关规定，结论为该方法可作为控制以含栀子等中药制剂的内在质量。

　　4在中药材鉴别中的应用

　　虽然目前中药材的鉴别已采用许多现代的仪器方法，但是这些方法在应用中仍存在着不少缺陷，利用毛细管电泳技术测定中药材中的有效成分如有机酸、蛋白质、多肽、氨基酸、生物碱和酶等，分析活性成分的指纹图谱，不仅对中药的其道地性 (地理分布)、引种与分化变异的本质从分子水平阐释提供崭新的客观依据，也是对常规鉴别方法有益的补充。王德先等[11]利用毛细管电泳法鉴别天麻及其 4种常见伪品以及测定天麻中有效成分天麻素，通过比较电泳谱图和天麻素加标实验，4种伪品与天麻可以很容易鉴别，天麻中的天麻素可以达基线分离。王寅等[12]以HPCE法对不同属群大青叶药材的理化特征差异进行研究，结果表明异地栽培的不同属群大青叶药材酸性提取部位的化学成分及含量有显著差别，依据电泳图谱中特征峰的迁移时间和峰面积，能有效鉴别不同属群的大青叶药材。孙沂[13]等采用毛细管区带电泳法建立10批红花道地药材的指纹图谱，同时将9个产地的红花药材以及红花的对照药材加以比较，结果显示在红花道地药材的指纹图谱中，共有峰的相对迁移时间的RSD<1.8 %，相对峰面积的RSD<6.2 %;在不同产地红花药材的指纹图谱中， 共有峰的相对峰面积有一定的差别。林瑞超等[14]采用MECC分离模式，建立了卷柏属11种不同药用植物的HPCE指纹图谱， 表明不同地域的卷柏属植物中黄酮类化合物的分布存在明显差别，可用于卷柏属药用植物的鉴别。

　　5结语

　　高效毛细管电泳以其高效、快速、简便且柱不易受污染而优于 HPLC法，在中药有效成分的分离、定性定量、中药材鉴别，手性化合物的拆分等方面应用将越来越广泛，目前仍存在重现性较差、线性范围窄和灵敏度较低等缺陷。随着商品仪器经不断改进和完善，加上自动进样器的普遍使用，基本可以克服重现性差的缺陷，与常规HPLC法接近;灵敏度低可通过在柱预浓缩如场放大堆积效应，或经浓缩预处理如固相萃取等技术加以改善。此外，HPCE法可与其它进样技术如流动注射联用，不但可提高测定精度，而且能完成连续自动进样及在线分析，方便大批量样品的测定，或采用 CEMS、CENMR及 CEMSMS的联用技术，充分利用HPCE的高分离效率和MS或NMR的高灵敏度与定性鉴定能力，快速完成众多复杂成分的分离与结构鉴定，将大大提高和拓宽了CE的性能和应用范围，更适用于中药复杂化学成分的分离与测定。相信在不久的将来，随着新型分离技术的应用，中药现代化的进程必取得辉煌成就。

　　参考文献：

　　[1]朱涛，方晓红，孙亦梁. 高效毛细管电泳：分析化学中的一个新的前沿领域 [J]. 化学进展，1994，6(3)：229229.

　　[2]郝红艳，郭济贤，顺庆生，等. HPLC和HPCE法测定罂粟壳中 3种生物活性生物碱 [J].药学学报，2000，35( 4)：289289.

　　[3]陈勇川，穆海川，刘松青. 高效毛细管电泳法测定槐花和槐角中芦丁的含量[J]. 华西药学杂志，2002，17(4)：284284.

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文章名称： 浅析高效毛细管电泳技术与现代中药

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